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Secado de geles de electroforesis: procedimiento y elección de la bomba de vacío

Procedimiento para secar geles de electroforesis con secador al vacío o con el método sándwich de celofán, y criterios para elegir la bomba de vacío.

Esta guía explica para qué se seca un gel de electroforesis, cómo se hace con un secador de geles al vacío y qué revisar al elegir la bomba. También compara el secador con el método sándwich de celofán.

Para qué se seca un gel

La electroforesis en gel separa biomoléculas, normalmente ADN, ARN o proteínas, según propiedades como el peso molecular y la carga. Según el principio de separación, existen técnicas como la electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE), el isoelectroenfoque (IEF) y la electroforesis bidimensional (2-DE).

Si el gel no se analiza ni se transfiere inmediatamente después de la electroforesis, puede secarse. El secado fija las moléculas separadas mientras elimina la humedad, y el gel queda como una lámina sólida. Sirve para conservar el gel como registro o para mantener estable la muestra antes de análisis posteriores, como autorradiografía, rehidratación del gel o espectrometría de masas.

Cómo funciona un secador de geles al vacío

El secador de geles al vacío calienta el gel y, al mismo tiempo, aplica vacío. Así retira la humedad de manera uniforme, acelera el secado y ayuda a evitar que el gel se agriete.

Elija la bomba de vacío

Considere estos puntos al seleccionar la bomba:

  • Resistencia química: en la preparación del gel pueden usarse productos químicos. Rocker recomienda bombas resistentes a la corrosión para proteger el equipo.
  • Temperatura y vacío: para no desnaturalizar ni dañar el gel, no fije temperaturas demasiado altas. Elija un modelo de alto vacío para bajar el punto de ebullición del agua.
  • Recuperación de vapores: el secado libera mucho vapor. Use una trampa fría o trampa de vapor para recuperar el vapor de solvente; protege al personal y prolonga la vida de la bomba.
  • Tipo de gel: la bomba depende de la concentración del gel (% de gel) y del grado de secado esperado. A mayor concentración del gel, mayor es el vacío requerido.

Para esta aplicación, Rocker recomienda la bomba de vacío recubierta de PTFE Rocker 410C y las bombas resistentes a químicos Chemker 410, Chemker 411, Chemker 610 y Chemker 611. La fuente no indica cuál corresponde a cada tipo de gel; compare el vacío y el caudal de cada modelo en su ficha según su gel y su secador.

Procedimiento con secador de geles al vacío

  1. Transfiera el gel a papel filtro.
  2. Si el gel tiene marcaje radiactivo y hará autorradiografía después del secado: (a) transfiera el gel a dos hojas de papel filtro para absorber los contaminantes radiactivos; (b) cubra la parte superior del gel con film plástico, eliminando las burbujas de aire, para no contaminar la junta de sellado transparente de silicona.
  3. Coloque el gel en el secador, con el papel filtro hacia abajo, y encienda la bomba de vacío.
  4. Cubra con la junta de sellado transparente de silicona y elimine las burbujas de aire.
  5. Cierre la tapa del secador.
  6. Ajuste los parámetros (tiempo, temperatura, ciclo de calentamiento, etc.) e inicie el secado.

Este es el orden que indica Rocker. Si el manual de su secador de geles indica otro momento para encender la bomba de vacío, siga el manual.

Alternativa: método sándwich con celofán

El método sándwich con celofán es un secado natural al aire, muy usado en laboratorio:

  1. Humedezca el celofán con agua y extiéndalo sobre una placa de vidrio. El celofán debe tener mayor área que el vidrio.
  2. Coloque el gel extendido en el centro del celofán.
  3. Cubra el gel con otra lámina de celofán humedecido.
  4. Doble el celofán sobrante hacia el reverso del vidrio, alise la superficie con la mano para eliminar el exceso de agua y seque el agua restante con toalla de papel. Deje secar al aire.
  5. Una vez seco, recorte el celofán sobrante. El gel puede conservarse de forma permanente.

Elimine todas las burbujas entre el celofán y el gel para evitar grietas durante el secado. Un daño menor en el gel, o sellarlo antes de que recupere su tamaño original, también puede agrietarlo.

Secador de geles o método sándwich

Aspecto Secador de geles Método sándwich
Principio Calor y vacío Secado al aire
Tiempo de secado Más corto Más largo
Tamaño del gel (área) Admite un rango más amplio de placas (según la plataforma) Menor (generalmente 10×10 cm / 8×10 cm)
El gel no se deforma ni se rompe con facilidad Sí No
Geles de electroforesis en general Sí Sí
Geles con marcaje radiactivo Sí No
Costo del equipo Mayor Menor
Espacio requerido Mayor Menor
Seguridad de operación Alta (con equipo de condensación) Alta

Aplicaciones del secado de geles

  • Secado de geles de electroforesis en laboratorios de biología molecular y bioquímica: gel de agarosa, SDS-PAGE, IEF, electroforesis bidimensional, entre otros.
  • Investigación biológica, por ejemplo en genética, con ADN, ARN y proteínas.
  • Investigación básica, incluido el pretratamiento para análisis como autorradiografía o densidad óptica.

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Consulte la configuración y variante en cada ficha antes de seleccionar el equipo.

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Fuentes

Secado al vacío en laboratorio: cómo elegir desecador y bomba
Cómo funciona el secado al vacío en laboratorio y qué desecador y bomba elegir según el tipo de muestra y el tamaño de la cámara.